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的特点:
1、一站式,用户只需要准备PCR产物即可进行AT克隆。
2、T载体由XcmI酶切方法制备,两个5"端含T突出,自连率几乎为零。
3、克隆效率高,一次AT克隆实验一般能得到上百个重组子。
4、阳性率高,一般能到90%以上,大大缩短了筛选工作。
5、提供供两次实验用的对照插入片段,方便分析实验数据。
6、插入位点两侧有对称的常见酶切位点,便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7、克隆位点两侧分别有T7和SP6RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8、可以使用pUC/M13Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9、T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
10、含有丝状噬菌体f1复制起始子,可以制备单链DNA。
Clone Smaster的优势:
1、直接将DNA克隆到环状载体;
2、试剂成本低;
3、线性PCR产物和环状质粒上的DNA(单个,或多个,或混合)均可直接克隆到目标载体;
4、该方法既可用于通用重叠序列(接头)的标准化克隆,也可用于特需要求的去除接头序列的无缝克隆;
5、配套载体改造试剂盒,让自己的载体可一键改造为Nimble通用载体。